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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號(hào) | HZ-75242 |
用途 | 科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 否 |
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售I型與新型鴨病毒性肝炎一步法RT-PCR鑒別診斷試劑盒現(xiàn)貨,我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全,且具有優(yōu)勢價(jià)格,歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
名稱:I型與新型鴨病毒性肝炎一步法RT-PCR鑒別診斷試劑盒
規(guī)格: 20T/50T
品牌:上海滬崢
【用途】 用于鴨病毒性肝炎的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查【操作步驟】1.RNA提取 (1) 取疑似鴨病毒性肝炎的病料(*、*、淋巴結(jié)等)1~4g于無菌研缽,研磨并用PBS液(pH7.2~7.4)稀釋成1:4乳劑,分裝1.5ml滅菌EP管,反復(fù)凍融2~3次,8000r/mi離心5分鐘。(病毒培養(yǎng)液,只需凍融1次即可8000r/min心5分鐘)2)取200uL上清液(或標(biāo)準(zhǔn)品T),移入新的1.5mL滅EP管中,加入200uLSR-I,漩渦振蕩混合均勻,靜置5min。
(3)加75uL TU-1,漩渦振蕩混合均勻,10000r/min離心5 min。
(4)將上清轉(zhuǎn)移到新的2 ml離心管(試劑盒內(nèi)提供)中,加入300 uL 異丙醇(1%冰乙酸),上下倒置6-8次,混合均勻。
(5)將步驟4中的混合液移入制備管中,并將制備管置于同一2 ml離心管,10000 r/min離心1min。
(6)棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,加500 uL SR-II,室溫靜置1min,10000 r/min離心1 min。
(7)棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,加700 uL SR-Ⅲ,10000 r/min離心1 min。
(8)將制備管置回到2 ml離心管中,10000 r/min離心1 min。
(9) 將制備管置于潔凈的1.5 ml離心管中(試劑盒內(nèi)提供),在制備管膜中央加40 uL TU-2, 室溫靜置1 min。10000 r/min離心1 min洗脫。洗脫液即為模板,即用或-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
3 .PCR操作
4.電泳
配制1%瓊脂糖凝膠,取PCR產(chǎn)物5uL混合1uL TU-8,加樣于凝膠孔中,同時(shí)在相鄰孔加3uLTU-7,在120v 電壓下,1×TAE液中電泳15分鐘,在紫外成像儀下觀察結(jié)果。
【結(jié)果判定】
在約230bp位置出現(xiàn)擴(kuò)增帶,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為I型鴨肝炎病毒檢測為陽性;在約705bp位置出現(xiàn)擴(kuò)增帶,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為新型型鴨肝炎病毒檢測陽性
I型與新型鴨病毒性肝炎一步法RT-PCR鑒別診斷試劑盒
【注意事項(xiàng)】
1. 每次使用,開蓋之前請(qǐng)先瞬時(shí)離心,使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存,-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融,使用后的試劑立即放回,避免在室溫?cái)R置太久。
3. 盡量建立PCR試驗(yàn)操作區(qū),避免交叉污染。
4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,由于操作失誤、移液器不精確、定時(shí)不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況,不予負(fù)責(zé)。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前,要高壓滅菌,操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁,可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染,在有效期限前用完。
血清學(xué)診斷技術(shù)
血清學(xué)診斷技術(shù)是建立在抗原與相應(yīng)抗體在體外發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)基礎(chǔ)上的檢測技術(shù),隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和提高,血清學(xué)抗體檢測新技術(shù)層出不窮,應(yīng)用面也日益擴(kuò)大。如病毒中和試驗(yàn)、血凝和血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)、血清平板和試管凝集試驗(yàn)、免疫膠體金層析技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,這些試驗(yàn)方法已被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室熟練掌握應(yīng)用。如布病采用平板或試管凝集試驗(yàn),禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制試驗(yàn),豬瘟和口蹄疫采用間接血凝試驗(yàn);采用 ELISA 試驗(yàn)檢測禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫病,養(yǎng)殖場也可采用血凝試驗(yàn)和免疫金標(biāo)技術(shù)來檢測免疫抗體滴度,操作簡便快速,使抗體監(jiān)測技術(shù)真正得以推廣 , 切實(shí)為動(dòng)物疫病防控提供有力的幫助。