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梨支原體PCR檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn):具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn),值得信賴(lài)的PCR技術(shù)新方法

梨支原體（Mycoplasma Pirum）最早是在1983年從細(xì)胞培養(yǎng)物中作為污染菌分離出來(lái)的，形態(tài)上呈長(zhǎng)頸瓶狀，在一端有末端結(jié)構(gòu)，具有分解葡萄糖和精氨酸的能力。由于存在血清學(xué)交叉反應(yīng)，它曾被誤認(rèn)為是生殖支原體（Mycoplasma Genitalium），后來(lái)更多的測(cè)試表明這是個(gè)新的物種，目前尚不清楚其自然宿主。梨支原體可以從免疫系統(tǒng)功能受損的病人中分離出來(lái)，也可以從艾滋病患者中分離出來(lái)，因此也被稱(chēng)為“艾滋病相關(guān)支原體”。它具有侵襲黏膜細(xì)胞的特性，釋放介質(zhì)所致的局部炎癥反應(yīng)可致生殖道黏膜的破潰，使HIV更易侵入宿主細(xì)胞造成感染。

體外培養(yǎng)法和PCR法均可用于檢測(cè)梨支原體，由于與多種支原體有交叉反應(yīng)，血清學(xué)方法不適用于檢測(cè)梨支原體。體外培養(yǎng)法是經(jīng)典的檢測(cè)方法，梨支原體營(yíng)養(yǎng)要求高，分離培養(yǎng)難度大，因此PCR法是更好的選擇。PCR法具有靈敏度高和特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，且檢測(cè)時(shí)間短，僅需幾個(gè)小時(shí)即可獲得結(jié)果。

梨支原體PCR檢測(cè)試劑盒選取了16S rRNA基因的一段序列進(jìn)行PCR鑒定，引物經(jīng)BLAST驗(yàn)證為特異性靶向梨支原體。使用本試劑盒檢測(cè)了7個(gè)梨支原體菌株、16種其他支原體、以及4株革蘭氏陰性或陽(yáng)性細(xì)菌，僅梨支原體各菌株產(chǎn)生特異性條帶。可見(jiàn)本試劑盒具有物種特異性，可用于梨支原體的鑒定和檢測(cè)。

 本試劑盒僅供科研使用。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：梨支原體PCR檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng):PCR Detection Kit for Mycoplasma Pirum

產(chǎn)品規(guī)格：20T/50T/100T

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

儲(chǔ)存條件】 反應(yīng)試劑盒存于-20 ℃保存，盡量避免反復(fù)凍融。

【有效期】 本試劑盒有效期為十二個(gè)月。

PCR Detection Kit for Mycoplasma Pirum特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)

1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。

    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

    4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

    5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

先用隨機(jī)引物將 RNA 反轉(zhuǎn)錄成 cDNA，然后設(shè)計(jì)特異性的引物和熒光探針(TaqMan 探針),進(jìn)行 熒光定量 PCR 檢測(cè)。TaqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它設(shè)計(jì)為與目標(biāo)序列上游引物和下游引物 之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的 5’末端，而淬滅劑則在 3’末端。當(dāng)完整的探針與目 標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與 3’端的淬滅劑接近而被淬滅，但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)， qTaq 聚合酶的 5’外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離,熒光強(qiáng)度得到檢測(cè)。 隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累，因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。

梨支原體PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):

1. 試劑盒各組份使用前請(qǐng)充分融化并搖勻,離心管內(nèi)的試劑需離心數(shù)秒后使用。 2 PCR操作各階段應(yīng)在不同實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

3 在試劑和標(biāo)本準(zhǔn)備階段使用負(fù)壓超凈臺(tái)。

4 應(yīng)穿工作服，戴一次性手套（經(jīng)常替換手套），使用一次性用品。

5 PCR操作人員應(yīng)具有經(jīng)驗(yàn)和受過(guò)培訓(xùn)。

6操作過(guò)程中用到的超凈臺(tái)、移液器、離心機(jī)、擴(kuò)增儀等儀器設(shè)備應(yīng)經(jīng)常用10%次氯酸或70%乙醇或 紫外燈處理。

7 陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)和待檢標(biāo)本平行進(jìn)行操作后方可進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

8 使用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程操作。

9本試劑盒僅供科研使用。