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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZT3242 |
用途 | PCR 檢測 |
包裝規(guī)格 | 20T |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號 | |
是否進口 | 否 |
生殖支原體PCR檢測試劑盒產(chǎn)品及特點:具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點,值得信賴的PCR技術新方法
產(chǎn)品名稱:生殖支原體PCR檢測試劑盒
英文名稱:PCR Detection Kit for Mycoplasma Orale
產(chǎn)品規(guī)格:20T/50T/100T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件】 反應試劑盒存于-20 ℃保存,盡量避免反復凍融。
【有效期】 本試劑盒有效期為十二個月。
口腔支原體PCR檢測試劑盒反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子*很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
生殖支原體PCR檢測試劑盒注意事項:
1. 試劑盒各組份使用前請充分融化并搖勻,離心管內(nèi)的試劑需離心數(shù)秒后使用。 2 PCR操作各階段應在不同實驗室進行。
3 在試劑和標本準備階段使用負壓超凈臺。
4 應穿工作服,戴一次性手套(經(jīng)常替換手套),使用一次性用品。
5 PCR操作人員應具有經(jīng)驗和受過培訓。
6操作過程中用到的超凈臺、移液器、離心機、擴增儀等儀器設備應經(jīng)常用10%次氯酸或70%乙醇或 紫外燈處理。
7 陽性對照應和待檢標本平行進行操作后方可進行PCR擴增。
8 使用本試劑盒應視為有傳染性物質,請按傳染病實驗室檢查規(guī)程操作。
9本試劑盒僅供科研使用。