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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZS0243 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱：對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）
【儲存條件及有效期】2~8℃，有效期為12個(gè)月。
包裝規(guī)格】50T/100T
產(chǎn)品簡介】
本產(chǎn)品基于恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)，在恒溫條件下對對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)特異基因片段進(jìn)行擴(kuò)增及檢測，并針對各種樣品進(jìn)行反應(yīng)體系的優(yōu)化，可在極短時(shí)間內(nèi)給出準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。
· 可檢測樣本
水產(chǎn)活體：親蝦、蝦苗、魚類、貝類、蟹類
產(chǎn)品特點(diǎn)】
快速檢測：60分鐘內(nèi)完成檢測，實(shí)時(shí)熒光檢測儀可判讀結(jié)果。
特異性強(qiáng)：針對靶基因的6個(gè)區(qū)段設(shè)計(jì)引物，保證擴(kuò)增特異性。
靈敏度高：比傳統(tǒng)PCR靈敏度高。
操作簡單：一步加樣后，65℃恒溫條件下即可完成擴(kuò)增。
對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒根據(jù)對蝦傳染性肌肉壞死病毒基因組設(shè)計(jì)特異性引物和探針，用熒光 PCR 技術(shù)對核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
名 稱 規(guī) 格
核酸提取液 1.5mL×2 管
酶液 50μL×1 管
反應(yīng)液 1.0mL×1 管
陽性質(zhì)控品 50μL×1 管
陰性質(zhì)控品 250μL×1 管
注：
1）不同批號試劑不能混用。
2）試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測次數(shù)。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 7 次，有效期 12 個(gè)月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
【標(biāo)本采集】
病死或撲殺豬，取分泌物、血液、*、扁桃體、*和淋巴結(jié)等
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
【使用方法】
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
組織樣品：每份組織分別從 3 個(gè)不同的位置稱取樣品約 1g，手術(shù)剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；全血樣本：待血凝固后，取血清 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。
1.2DNA 提取
1)對上述處理好的標(biāo)本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒溫處理 10min，13,000
rpm 離心 5min，取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；
2)DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA 提取試劑盒
（離心柱提取法），請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。
2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 ASFV 反應(yīng)液 酶液
用量（樣本數(shù)為 N） 20μL 1μL
將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，21uL/管。
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；
4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；
熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）
NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光，選擇 None 即可。
5.2結(jié)果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。
可疑：檢測通道 Ct 值>35.0，且出現(xiàn)明顯擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和明顯擴(kuò)增曲線者為陽性，否則為陰性。
陰性：樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴(kuò)增曲線。
6.檢測方法的局限性
樣本檢測結(jié)果不樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；
樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
不同的提取方法存在提取效率差異，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果；
本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
7.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品：無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示；
陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）【注意事項(xiàng)】
所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；
試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完全混勻幵短暫離心；
反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)與用工作服；
樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；
實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，幵按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理
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