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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZS0339 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 |
產(chǎn)品名稱：牛結(jié)核分枝桿菌檢測試劑盒
規(guī) 格： 50T
檢測方法： 實時熒光 PCR
保存方式： 2~8℃
有 效 期： 1年
產(chǎn) 地： 中國
用 途： 僅用于科研實驗
訂購流程：牛結(jié)核分枝桿菌檢測試劑盒
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4.如因單位財務制度原因，可申請先發(fā)貨，報賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好的 客戶）。
1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1 樣本前處理
組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿，勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中；
液體標本：取適量標本13000rpm離心2min，棄上清。
1.2 DNA提取
1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液，100℃恒溫處理10分鐘，13,000 rpm離心5分鐘，取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2. 試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)代檢測樣本總數(shù)，設所需要的PCR反應管管數(shù)為N（N=樣本數(shù)+1
管陰性對照+1管陽性對照），體系配制如下表：
試劑
WSSV 反應液
酶液
用量（樣本數(shù)為N）
20μl
1μl
3. 加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟1提取的DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μl，加入相應的
反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4. PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內(nèi)；
5. 結(jié)果分析判定
結(jié)果分析條件設定
設置基線（baseline）：一般情況下，對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle，對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調(diào)整。
設置閾值（threshold）:以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線（無規(guī)則的噪音線）的zui高點。
結(jié)果判斷
陽性：檢測樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長期；
可疑：檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復一次實驗，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長期，為陽性，否則為陰性；
陰性：檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結(jié)果的解析
實驗室環(huán)境污染，試劑污染，標本交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果。
7. 質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品：擴增曲線無對數(shù)生長期或無Ct值顯示；
陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯對數(shù)生長期，且Ct值≤32;
以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。
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