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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZS0361 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱：唾液樣本核酸提取試劑盒
規(guī) 格： 50T
檢測方法： 實(shí)時熒光 PCR
保存方式： 2~8℃
有 效 期： 1年
產(chǎn) 地： 中國
用 途： 僅用于科研實(shí)驗(yàn)
訂購流程：唾液樣本核酸提取試劑盒
電話或通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
1.報價含普票、運(yùn)費(fèi)。
2.進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。
3.訂貨時間為工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因單位財務(wù)制度原因，可申請先發(fā)貨，報賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好的 客戶）。
唾液樣本核酸提取試劑盒
操作步驟
1 病毒 RNA 的提取
1.1 取已處理的樣品、陰性對照和陽性對照，分別加入裂解液 600 μL，充分顛倒混勻，室溫靜置 3～
5 min。
1.2 將液體吸入吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免離心時 堵塞吸附柱），13000 rpm 離心 30 s。
1.3 棄去收集管中液體，加入 600 μL 洗液，13000 rpm 離心 30 s。
1.4 重復(fù)步驟 1.3。
1.5 棄去收集管中液體，13000 rpm 空柱離心 2 min，以除去殘留的洗滌液。
1.6 將吸附柱移入新的 1.5 mL 離心管中，向柱中央加入洗脫液 50 μL，室溫靜置 1 min，13000 rpm
離心 30 s，離心管中液體即為模板 RNA。
2 實(shí)時熒光 RT-PCR 操作
設(shè)被檢樣品、陰性對照和陽性對照總和為 N，則反應(yīng)體系配制如下： 試劑 體系
無菌無核酸酶水 2.7（N+1）μL
RT-PCR 反應(yīng)液 10（N+1）μL
酶混合液 0.4（N+1）μL
熒光探針 1.9（N+1）μL
將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后，分裝每個反應(yīng)管中各 15 μL。
分別取 5 μL 模板 RNA，加入相應(yīng)反應(yīng)管中，混勻并作好標(biāo)記，在熒光 PCR 儀上進(jìn)行以下反應(yīng)：
45 ℃ 15 min，95 ℃ 1min；95 ℃ 5 s，60 ℃ 35 s，在每個循環(huán)第二步（60℃ 35s）收集熒光信號，共
40 個循環(huán)。（報告基團(tuán)“FAM”，淬滅基團(tuán)“None”）。
結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則：閾值線設(shè)定于剛好超過陰性對照擴(kuò)增曲線的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音
情況進(jìn)行調(diào)整。
2 結(jié)果描述及判定
陽性對照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線，陰性對照無 Ct 值并且無特定擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立；被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線為 AIV 陽性；被檢樣品 30＜Ct＜37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線，需重新取樣提取 RNA，擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定，如仍是可疑，可判定為陽性；被檢樣品 Ct 值≥37 時，超過本方法檢測靈敏度范圍，判定為陰性；對于某些未呈現(xiàn) S 型曲線，但本底較高的樣 品，應(yīng)為陰性。
實(shí)驗(yàn)操作
1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)?/span>NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。
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