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產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號(hào) | HZW0872 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱(chēng):轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE601核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
包裝:48T
分類(lèi):pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實(shí)驗(yàn)使用,不用于臨床診斷等
目的:本試劑盒適用于檢測(cè)疑似感染者或發(fā)病動(dòng)物等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE601核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;剛開(kāi)始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE601核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(30 uL 體系)
在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
樣品 |
陽(yáng)性對(duì)照 |
陰性對(duì)照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專(zhuān)一性引物對(duì) | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無(wú) | 2 uL |
EMCV 陽(yáng)性對(duì)照 | 無(wú) | 2 uL | 無(wú) |
補(bǔ)超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無(wú) |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE601核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 電泳檢測(cè)RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 286 bp。
轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE601核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
需要注意*:
PCR反應(yīng)液請(qǐng)?jiān)诒信渲?,然后置于PCR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)。這種冷啟動(dòng)法(Cool Start Method)與熱啟動(dòng)法(Hot Start Method)相結(jié)合,更能有效地減少PCR過(guò)程中的非特異性反應(yīng),增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性,能得到良好的PCR結(jié)果。
PCR的反應(yīng)條件:
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小,設(shè)定25~30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴(kuò)增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會(huì)出現(xiàn)Smear。